Quantification of blood loss for the diagnosis of postpartum hemorrhage: a systematic review and meta-analysis / Cuantificación de la pérdida de sangre para el diagnóstico de hemorragia posparto: revisión sistemática y metanálisis / Quantificação da perda sanguínea para o diagnóstico de hemorragia pós-parto: revisão sistemática e metanálise

ABSTRACT Objective: to compare the effectiveness of different diagnostic methods to estimate postpartum blood volume loss. Methods: a systematic review of effectiveness according to PRISMA and JBI Protocol. Searches in PubMed/MEDLINE, LILACS, Scopus, Embase, Web of Science and CINAHL, with descriptor "Postpartum Hemorrhage" associated with keyword "Quantification of Blood Loss". Tabulated extracted data, presented in metasynthesis and meta-analysis was applied to quantitative data. To assess risk of bias, JBI Appraisal Tools were applied. Results: fourteen studies were included, published between 2006 and 2021. Quantification of loss by any method was superior to visual estimation and is highly recommended, however the studies' high heterogeneity did not allow estimating this association. Conclusion: the studies' high heterogeneity, with a probable margin of error given the uncontrolled factors, indicates the need for further studies, however quantification proved to be effective in relation to visual estimate. PROSPERO registration CRD 42021234486.

RESUMEN Objetivo: comparar la efectividad de diferentes métodos diagnósticos para estimar la pérdida de volumen sanguíneo posparto. Métodos: revisión sistemática de efectividad según PRISMA y Protocolo JBI. Búsquedas en bases de datos: PubMed/MEDLINE, LILACS, Scopus, Embase, Web of Science y CINAHL, con el descriptor "Postpartum Hemorrhage" asociado a la palabra clave "Quantification of Blood Loss". Los datos extraídos tabulados fueron presentados en metasíntesis y metanálisis se aplicaron a los datos cuantitativos. Para evaluar el riesgo de sesgo, se aplicaron las herramientas de evaluación de JBI. Resultados: se incluyeron 14 estudios, publicados entre 2006 y 2021. La cuantificación de pérdida por cualquier método fue superior a la estimación visual y es muy recomendable, sin embargo, la alta heterogeneidad de los estudios no permitió estimar esta asociación. Conclusión: la alta heterogeneidad de los estudios, con probable margen de error dado el descontrol de los factores, indica la necesidad de más estudios, sin embargo la cuantificación demostró ser efectiva en relación a la estimación visual. Registro PRÓSPERO CRD 42021234486.

RESUMO Objetivo: comparar a efetividade de diferentes métodos diagnósticos para estimar a perda volêmica sanguínea pós-parto. Métodos: revisão sistemática de efetividade, de acordo com protocolo PRISMA e JBI. Buscas nas bases PubMed/MEDLINE, LILACS, Scopus, Embase, Web of Science e CINAHL, com o descritor "Postpartum Hemorrhage" associado à palavra-chave "Quantification of Blood Loss". Dados extraídos tabulados, apresentados em metassíntese, e aplicou-se metanálise para dados quantitativos. Para avaliar o risco de viés, aplicou-se o JBI Appraisal Tools. Resultados: incluídos 14 estudos, publicados entre 2006 e 2021. A quantificação da perda por qualquer método apresentou superioridade em relação à estimativa visual, sendo altamente recomendada, porém a alta heterogeneidade dos estudos não permitiu estimar essa associação. Conclusão: a alta heterogeneidade dos estudos, com provável margem de erro dado aos fatores não controlados, indica a necessidade de realização de novos estudos, contudo a quantificação se mostrou efetiva em relação à estimativa visual. Registro PROSPERO CRD 42021234486.

¿A quiénes se cuenta? Narrativas sobre las métricas en salud de la población migrante venezolana en una zona de frontera en Colombia / Quem é contado? Narrativas sobre a métrica da saúde da população migrante venezuelana numa zona fronteiriça na Colômbia / Who counts? The health metric narratives of venezuelan migrants on the Colombian border

Resumen Colombia ha sido un país receptor de la migración venezolana originada por la situación sociopolítica del país vecino. Una de las necesidades para dar respuesta a esta crisis es la recolección de datos que permitan visibilizar y monitorear las condiciones de salud de esta población. A partir de un estudio cualitativo centrado en entrevistas y observación etnográfica, el artículo se orienta a caracterizar las variadas dinámicas de inclusión y de exclusión que forman parte de la producción de datos en salud de la población migrante en Cúcuta, un territorio de la frontera colombo-venezolana. A partir de las narrativas de diversos actores que, en el territorio, trabajan directamente en la recolección, el análisis y el uso de datos de salud de la población migrante, el articulo problematiza la construcción de la categoría migrante dentro de las métricas, develando aquello que se visibiliza y aquello que se ignora en el proceso sociotécnico que está detrás de la construcción de estos datos.

Resumo A Colômbia tem sido um país receptor da migração venezuelana devido à situação sociopolítica do país vizinho. Uma das necessidades para responder a esta crise é a coleta de dados que permitam visualizar e monitorizar as condições de saúde desta população. Com base num estudo qualitativo centrado em entrevistas e observação etnográfica, o artigo centra-se na caracterização das diferentes dinâmicas de inclusão e exclusão que fazem parte da produção de dados de saúde sobre a população migrante em Cúcuta, um território fronteiriço colombiano-venezuelano. Com base nas narrativas de vários atores que trabalham diretamente a nível territorial na coleta, análise e utilização de dados de saúde sobre a população migrante, o artigo problematiza a construção da categoria de "migrante" dentro da métrica, revelando o que é visível e o que é ignorado no processo sociotécnico por trás da construção destes dados.

Abstract Colombia has been a destination country of Venezuelan migration originated by the socio-political situation of the neighboring country. One of the needs to respond to this crisis is the collection of data to make visible and monitor the health conditions of this population. Based on a qualitative study centered on interviews and ethnographic observation, the article focuses on characterizing the different inclusion and exclusion dynamics in the production of health data of the migrant population in Cúcuta, a Colombian-Venezuelan border territory. Based on the narratives of various actors who work directly at the territorial level in the collection, analysis and use of health data of the migrant population, the article problematizes the construction of the category of "migrant" within the metrics, revealing what is visible and what is ignored in the socio-technical process behind the construction of these data.

Applications of the Dixon technique in the evaluation of the musculoskeletal system / Aplicações da técnica Dixon na prática radiológica do sistema musculoesquelético

Abstract The acquisition of images with suppression of the fat signal is very useful in clinical practice and can be achieved in a variety of sequences. The Dixon technique, unlike other fat suppression techniques, allows the signal of fat to be suppressed in the postprocessing rather than during acquisition, as well as allowing the visualization of maps showing the distribution of water and fat. This review of the Dixon technique aims to illustrate the basic physical principles, to compare the technique with other magnetic resonance imaging sequences for fat suppression or fat quantification, and to describe its applications in the study of diseases of the musculoskeletal system. Many variants of the Dixon technique have been developed, providing more consistent separation of the fat and water signals, as well as allowing correction for many confounding factors. It allows homogeneous fat suppression, being able to be acquired in combination with several other sequences, as well as with different weightings. The technique also makes it possible to obtain images with and without fat suppression from a single acquisition. In addition, the Dixon technique can be used as a quantitative method, allowing the proportion of tissue fat to be determined, and, in more updated versions, can quantify tissue iron.

Resumo A aquisição de imagens com supressão do sinal da gordura é um recurso de grande utilidade diagnóstica, existindo várias sequências capazes de realizá-la. A técnica Dixon, ao contrário de outras técnicas de supressão de gordura, permite suprimir a contribuição do sinal de gordura no pós-processamento e não durante a aquisição, além de permitir a visualização de mapas com a distribuição da água e da gordura. Esta revisão sobre a técnica Dixon almeja ilustrar os princípios físicos básicos, comparar a técnica com outras sequências de ressonância magnética para supressão ou quantificação de gordura, e descrever suas aplicações no estudo de doenças do sistema musculoesquelético. Muitas variantes da técnica Dixon foram desenvolvidas, proporcionando separação mais consistente dos sinais de gordura e água e permitindo correção de muitos fatores de confusão. Permite obter supressão homogênea de gordura, podendo ser adquirida de forma combinada com várias outras sequências, bem como com diferentes ponderações. Esta técnica possibilita também a obtenção de imagens com e sem supressão de gordura a partir de uma única aquisição. Adicionalmente, a técnica Dixon pode ser utilizada como recurso quantitativo, pois permite a mensuração do porcentual de gordura e, em versões mais atualizadas, consegue quantificar ferro tecidual.

Utilidad de la reserva de flujo fraccional para guiar la revascularización en un paciente con síndrome coronario agudo sin elevación del segmento ST / Utility of fractional flow reserve to guide revascularization in patients with acute coronary syndrome without ST segment elevation / Utilidade da reserva fracionária de fluxo para guiar a revascularização em paciente com síndrome coronariana aguda sem supradesnivelamento do segmento ST

Resumen: La reserva de flujo fraccional (FFR) es el patrón oro para evaluar la severidad funcional de una estenosis coronaria epicárdica. La revascularización guiada por fisiología coronaria ha demostrado su utilidad en la cardiopatía estable, pero también en el síndrome coronario agudo (SCA). Presentamos el caso de un paciente de 58 años con SCA, que presentó en la cineangiocoronariografía dos estenosis angiográficamente significativas, decidiéndose realizar una revascularización guiada por fisiología coronaria. Mediante la utilización de FFR, se determinó la necesidad de revascularizar solo una de las lesiones, llevando a un cambio en la conducta terapéutica que ejemplifica la virtud de contar con herramientas de estudio de la fisiología coronaria para la toma de decisiones.

Summary: Fractional flow reserve is the gold standard for evaluating the functional severity of an epicardial coronary stenosis. Coronary physiology-guided revascularization has been shown to be useful in stable heart disease, but also in acute coronary syndrome. We present the case of a 58-year-old patient with acute coronary syndrome, who presented two angiographically significant stenosis. We decided to perform revascularization guided by coronary physiology. Using fractional flow reserve, the need to revascularize only one of the lesions was determined, leading to a change in therapeutic behavior that exemplifies the virtue of having coronary physiology tools for decision-making.

Resumo: A reserva fracionária de fluxo é o padrão-ouro para avaliar a gravidade funcional de uma estenose coronariana epicárdica. A revascularização guiada pela fisiologia coronariana demonstrou ser útil em doenças cardíacas estáveis, mas também na síndrome coronariana aguda. Apresentamos o caso de um paciente de 58 anos com síndrome coronariana aguda, que apresentou duas estenoses angiograficamente significativas na angiografia coronariana, e decidiu realizar revascularização orientada pela fisiologia coronariana. Com o uso da reserva fracionária de fluxo, foi determinada a necessidade de revascularizar apenas uma das lesões, levando a uma mudança no comportamento terapêutico, que exemplifica a virtude de possuir ferramentas de fisiologia coronariana para a tomada de decisão.

Estratégias para identificação e quantificação de aminoácidos tipo micosporinas (MAAs) em cianobactérias e outros organismos para aplicação em cosmética e farmacêutica / Identification and quantification methods of mycosporine-like amino acids (MAAs) in cyanobacteria and other microorganisms for cosmetic and pharmaceutical application

Os aminoácidos tipo micosporinas (MAAs) são compostos, produzidos por algumas espécies de cianobactérias e outros microorganismos, principalmente quando são expostos a radiação ultravioleta (UVR). Estes compostos, que vêm demonstrando funções fotoprotetoras e antioxidantes, têm sido pesquisados para aplicação em protetores solares e em produtos antienvelhecimento. O presente estudo focou na caracterização de cianobactérias e outros organismos quanto à produção de MAAs com potencial aplicação em cosméticos. Neste estudo foram desenvolvidos diversos métodos para identificação (via HPLC-DAD-MS/HRMS), purificação (via HPLC-DAD) e quantificação de MAAs (via LC-MS/MS). Pelo método de identificação de MAAs verificou-se que, das 75 cianobactérias estudadas, 27 cepas (38%) sintetizam MAAs. A cepa Oscilatoria sp. CMMA 1600 produziu a maior diversidade de MAAs. 10 MAAs diferentes foram identificados incluindo um MAA de massa molecular 316 Da. Através de dados espectroscópicos obtidos via HPLC-DAD-HRMS e RMN 1D e 2D confirmou-se que se tratava da micosporina-glicina-alanina. A biossíntese natural deste composto por cianobactérias foi relatada pela primeira vez neste estudo. Quanto à quantificação de MAAs, o protocolo de extração otimizado possibilitou uma excelente recuperação dos compostos de interesse, além de ser bastante simples e não utilizar solventes poluentes. As análises via LC-MS/MS foram realizadas através de experimentos de MRM em modo positivo usando uma coluna de fase reversa. O método validado permitiu determinar e quantificar com precisão os MAAs porphyra-334, shinorina e micosporina-glicina-alanina em corridas de apenas 6 minutos, com limites de deteção inferiores a 0,005 µg.mg -1. Aplicando o método de LC-MS/MS realizaram experimentos de indução de MAAs através de exposição à UVR tendo-se observado um aumento da concentração de MAAs nas cepas que já sintetizam estes compostos e, outras cepas começaram a produzir pelo menos um MAA. As cepas de S. torques-reginae (ITEP-024 e ITEP-026) produziram a maior concentração de MAAs. A cepa ITEP-024 foi ainda exposta a diferentes radiações tendo-se observado que a UVB é que mais influencia a produção de MAAs. Neste estudo foi demonstrado o potencial das cianobactérias como produtores de MAAs que podem ser utilizados como fotoprotores em protetores solares

Mycosporines and mycosporine-like amino acids (MAAs) are UV-absorbing compounds produced by cyanobacteria and other organisms, especially upon exposer to solar ultraviolet radiation (UVR). These compounds are photoprotective and some have additional antioxidant functíons useful to the natural cosmetics market. This study aims to identify MAAs-producing cyanobacteria with potential applicatíons in cosmetics. A HPLC-DAD-MS/HRMS method for the identification of MAAs was developed. Out of the 75 cyanobacteria studied, 27 strains (38%) synthesized MAAs. Oscilatoria sp. CMMA 1600, from homocyte type, produced the greatest diversity of MAAs. 10 different MAAs were identified including a MAA with molecular weight of 316 Da. The chemical structure of mycosporine-glycine-alanine was confirmed by 1D/2D NMR and HRMS analyses. This compound has never been reported from a natural source. In this study, a validated LC-MS/MS quantification method for MAAs is also presented. An easy-to-handle and rapid extraction procedure was developed which uses only water and volatile additives as the extractor solvents. The LC-MS/MS method was performed using multiple reaction monitoring in positive mode with a reverse-phase column. The method enabled the accurate determination and quantification of the MAAs porphyra-334, shinorine and mycosporine-glycine-alanine in a 6 minutes running time, with limits of detection < 0.005 µg.mg-1. MAAs induction experiments were performed through UVR exposure. MAAs are constitutively produced by some cyanobacteria and production was further enhanced following UVirradiance. Other strains start to produce at least one MAA after UV-irradiance. Sphaerospermopsis torques-reginae strain (ITEP-024 and ITEP-026) produced the highest concentration of these photoprotective compounds. S. torques-reginae ITEP 024 strain was further exposed to different radiation compositíons. MAAs were significantly influenced by UVB. In this study, the potential of cyanobacteria as MAA producers, that can be used as photoprotectors in sunscreens, has been demonstrated

Anti-inflammatory, antinociceptive and antioxidant activities of the hydromethanolic fraction from Annona nutans leaves / Atividade anti-inflamatória, antinociceptiva e antioxidante da fração hidrometanólica das folhas de annona nutans

Annona nutans (Annonaceae) is a plant species found in Bolivia, Paraguay, Argentina, and the Brazilian Cerrado, specifically in the states of Mato Grosso and Mato Grosso do Sul (Brazil). Its common names are Araticû-Mi and Araticû-Ñu. The research contributions regarding the chemical composition and biological activities of extracts from A. nutans are rare, with only four articles being found in the literature. Therefore, the present study evaluated the anti-inflammatory and antinociceptive activities of the hydromethanolic fraction (FHMeOH) using carrageenan-induced paw edema and hot-plate tests. In addition, the antioxidant activity was evaluated by DPPH radical scavenging, total phenolic, flavonoid and tannin content assays and quantification of the major metabolites by LC-MS were performed. Oral treatment with the FHMeOH (at a dose of 300 mg.kg-1) significantly reduced paw edema 2 h and 4 h after the inflammatory stimulus. The intraperitoneal (i.p.) treatment with the FHMeOH (50 and 100 mg.kg-1) proved to be most effective, and the inhibition of acute inflammation was still visible 6 h after carrageenan injection. At doses of 50 and 100 mg.kg-1 (i.p.), FHMeOH exhibits central antinociceptive effects by increasing the latency of the reaction in the hot-plate model. The FHMeOH showed antioxidant potential, and the metabolites quercetin-3-O-galactoside, quercetin-3-O-glucoside, isorhamnetin-3-O-galactoside, quercetin-3-O-ß-D-apiofuranosyl-(1→2)-galactopyranoside, and chlorogenic acid were identified and quantified by LC-MS. Our results indicate, for the first time, that FHMeOH has anti-inflammatory, antinociceptive and antioxidant potential, and it is a promising source of studies for new herbal medicines

Annona nutans (Annonaceae) é uma espécie de planta encontrada na Bolívia, Paraguai, Argentina e no Cerrado brasileiro, especificamente nos estados de Mato Grosso e Mato Grosso do Sul (Brasil). Seus nomes mais comuns são aratico e Araticû-Mi e Araticû-Ñu. As contribuições da pesquisa em relação à composição química e atividades biológicas dos extratos de A. nutans são raras, com apenas quatro artigos encontrados na literatura. Portanto, o presente estudo avaliou as atividades anti-inflamatória e antinociceptiva da fração hidrometanólica (FHMeOH) utilizando edema de pata induzido por carragenina e testes de placaquente. Além disso, a atividade antioxidante foi avaliada por meio de sequestro de radical DPPH, e foram realizados ensaios de quantificação de fenóis, flavonoides e taninos totais e quantificação dos principais metabólitos por CL-EM. O tratamento oral com a FHMeOH (na dose de 300 mg.kg-1) reduziu significativamente o edema da pata 2 e 4 h após o estímulo inflamatório. Por outro lado, o tratamento intraperitoneal (i.p.) com FHMeOH (50 e 100 mg.kg-1) provou ser mais eficaz e a inibição da inflamação aguda foi ainda visível 6 horas após a injeção de carragenina. Nas doses de 50 e 100 mg.kg-1 (i.p.), FHMeOH exibiu efeitos antinociceptivos centrais aumentando a latência da reação no modelo de placa quente. FHMeOH apresentou potencial antioxidante e os metabólitos quercetina-3-O-galactosídeo, quercetina-3-O-glicosídeo, isoramnetina-3-O-galactosídeo, quercetina- 3-O-ß-D-apiofuranosil-(1 → 2)-galactopiranosídeo e ácido clorogênico foram identificados e quantificados por CL-EM. Nossos resultados indicam, pela primeira vez, que o FHMeOH possui efeitos anti-inflamatórios, antinociceptivos e antioxidantes, sendo uma fonte promissora de estudos para novos medicamentos fitoterápicos.

The annatto carotenoids and the norbixin absorption coefficient / Carotenoides de urucum e o coeficiente de absorção da norbixina

Annatto seeds present cis-bixin as the major carotenoids, but the norbixin salt is the mainpigment present in dyes obtained from the alkaline extraction process. For analyzing the norbixin,the absorptions are obtained in the two spectral peaks with higher intensity, but discrepanciesin the published extinction values have led to serious doubts. Taking into account the use ofabsorption coefficient for evaluating the norbixin concentration in annatto seeds and extracts, thepresent study evaluated the absorption coefficient in various solvents and the total uncertaintyassociated with this value was determined. The norbixin standard was prepared from annattoseeds, purified by column chromatography and the purity of norbixin was evaluated by HPLC-DAD.The absorption coefficients were determined for norbixin in different solvents and the uncertaintywas evaluated. The 0.5% potassium hydroxide, the main solvent used for marketing the annattoseeds and extracts, showed the absorption coefficients of 2887 at 454nm and of 2546 at 483nm,and the estimation of expanded uncertainty (K=2) was ±86 and 85 g 100 mL-1, respectively.

O principal carotenoide em sementes de urucum é a cis-bixina, mas o sal de norbixina torna-seo principal pigmento presente em corantes obtidos pelo processo de extração alcalino.Para a análise de norbixina as absorbâncias são obtidas nos dois picos espectrais de maiorintensidade, mas discrepâncias no valor de absortividade levam a sérias dúvidas. Levando-se emconta o uso do coeficiente de absorção na avaliação da concentração de norbixina em sementesde urucum e extratos, este trabalho teve como objetivo avaliar o coeficiente de absorção emvários solventes e determinar a incerteza expandida associada a esse valor. Para a execução doestudo, um padrão de norbixina foi preparado a partir de sementes de urucum, purificado emcoluna aberta e a pureza da norbixina foi avaliada por HPLC-DAD. O coeficiente de absorçãoda norbixina foi determinado pela construção de curvas analíticas em diferentes solventes e aincerteza expandida foi avaliada. O hidróxido de potássio a 0,5%, principal solvente utilizadona comercialização de sementes de urucum e extratos, apresentou o coeficiente de absorçãodeterminado em 2887 a 454nm e 2546 a 483nm e a estimação da incerteza expandida (K=2) foi86 e 85 g 100 mL-1, respectivamente.

The annatto carotenoids and the norbixin absorption coefficient / Carotenoides de urucum e o coeficiente de absorção danorbixina

Annatto seeds present cis-bixin as the major carotenoids, but the norbixin salt is the main pigment present in dyes obtained from the alkaline extraction process. For analyzing the norbixin, the absorptions are obtained in the two spectral peaks with higher intensity, but discrepancies in the published extinction values have led to serious doubts. Taking into account the use of absorption coefficient for evaluating the norbixin concentration in annatto seeds and extracts, the present study evaluated the absorption coefficient in various solvents and the total uncertainty associated with this value was determined. The norbixin standard was prepared from annatto seeds, purified by column chromatography and the purity of norbixin was evaluated by HPLC-DAD. The absorption coefficients were determined for norbixin in different solvents and the uncertainty was evaluated. The 0.5% potassium hydroxide, the main solvent used for marketing the annatto seeds and extracts, showed the absorption coefficients of 2887 at 454nm and of 2546 at 483nm, and the estimation of expanded uncertainty (K=2) was ±86 and 85 g 100 mL-1, respectively.

O principal carotenoide em sementes de urucum é a cis-bixina, mas o sal de norbixina torna-se o principal pigmento presente em corantes obtidos pelo processo de extração alcalino.Para a análise de norbixina as absorbâncias são obtidas nos dois picos espectrais de maior intensidade, mas discrepâncias no valor de absortividade levam a sérias dúvidas. Levando-se em conta o uso do coeficiente de absorção na avaliação da concentração de norbixina em sementes de urucum e extratos, este trabalho teve como objetivo avaliar o coeficiente de absorção em vários solventes e determinar a incerteza expandida associada a esse valor. Para a execução do estudo, um padrão de norbixina foi preparado a partir de sementes de urucum, purificado em coluna aberta e a pureza da norbixina foi avaliada por HPLC-DAD. O coeficiente de absorção da norbixina foi determinado pela construção de curvas analíticas em diferentes solventes e a incerteza expandida foi avaliada. O hidróxido de potássio a 0,5%, principal solvente utilizado na comercialização de sementes de urucum e extratos, apresentou o coeficiente de absorção determinado em 2887 a 454nm e 2546 a 483nm e a estimação da incerteza expandida (K=2) foi86 e 85 g 100 mL-1, respectivamente.

Determination and validation of secnidazole in tablets by UV spectrophotometric / Determinação e validação do secnidazol em comprimidos por espectrofotometria na região do ultravioleta

Secnidazole, a 5-nitroimidazole, is a drug used in the treatment against protozoa, and several bacterial infections. This study purpose was to develop and validate a UV spectrophotometric method to determine secnidazole in pharmaceutical tablet dosage forms once there is no method reported in the pharmacopoeia yet. The quantification was performed using methanol as solvent at 325 nm (maximum wavelength) and three kinds of products marketed in Brazil (reference, generic and similar tablets) containing 1g of secnidazole. The method obeyed Beer's law in the concentration range of 4 - 20 µgmL-1 respectively. The method was validated according to the International Conference on Harmonization (ICH) and Brazil National Health Surveillance Agency (ANVISA) guidelines, showing accuracy, precision, selectivity, robustness and linearity. Tests such as weight range, friability, disintegration, hardness and dissolution were carried out to check tablets' quality and all the trials showed to be in accordance with the general test guidelines of the Brazilian Pharmacopoeia. The dissolution test was carried out and the developed method was applied. The method developed is suitable for the estimation of secnidazole in tablets without any interference from the excipients and can be used for routine in quality control. Still, it's a simple, fast and low cost method.

Secnidazol, um nitroimidazólico, é um fármaco utilizado no tratamento para protozoários, e várias infecções bacterianas. Este trabalho propôs o desenvolvimento e validação de um método espectrofotométrico na região do ultravioleta para a determinação de Secnidazol na forma farmacêutica de comprimidos, uma vez que não há nenhum método relatado nas farmacopeias. A quantificação foi realizada utilizando metanol como solvente a 325 nm (máximo de comprimento de onda) e usando três tipos de produtos comercializados no Brasil (de referência, genéricos e comprimidos similares) contendo 1g de Secnidazol. O método obedeceu a lei de Beer no intervalo de concentração de 4 - 20 µgmL-1, respectivamente. O método foi validado de acordo com a Conferência Internacional de Harmonização (ICH) e diretrizes da Agência Nacional de Vigilância Sanitária do Brasil (ANVISA), apresentando exatidão, precisão, seletividade, robustez e linearidade. Testes como variação de peso, friabilidade, desintegração, dureza e dissolução foram realizados para verificar a qualidade de comprimidos e mostrou-se de acordo com os testes gerais da Farmacopeia Brasileira. O teste de dissolução realizado e o método desenvolvido pode ser aplicado. O método desenvolvido é adequado para a estimativa de secnidazole em comprimidos sem qualquer interferência dos excipientes e pode ser usado para a rotina de controlo de qualidade. Ainda, é um método simples, rápido e de baixo custo.

Caracterização histomorfológica do sistema tegumentar auricular de cateto - Pecari tajacu Linnaeus, 1758) / Histomorphological characterization of collared peccary (Pecari tajacu Linnaeus, 1758) ear integumentary system

A criopreservação de tecido somático derivado da pele de catetos consiste numa alternativa para a conservação da biodiversidade por meio da associação com a transferência nuclear. Nesse contexto, a manipulação de tecidos da pele é uma etapa crucial para o sucesso dessa biotécnica. Portanto, o objetivo do presente estudo, foi caracterizar o sistema tegumentar auricular periférico de catetos, visando aprimorar a conservação tecidual. Para tanto, fragmentos auriculares de oito animais foram avaliados quanto às camadas teciduais, aos componentes, à atividade proliferativa e à viabilidade metabólica, usando-se as colorações hematoxilina-eosina e tricrômico de Gomori, quantificação de AgNORs e microscopia eletrônica de transmissão. Assim, tamanhos de 104,2µm e 222,6µm foram observados para epiderme e derme, com uma proporção volumétrica de 36,6% e 58,7%, respectivamente. Além disso, na epiderme, foram evidenciadas as camadas basal (22,5µm), intermediárias (53,5µm) e córnea (28,2µm), com valores médios de 65,3 células epidermais, 43,4 melanócitos e 14,8 halos perinucleares. Já a derme apresentou 127 fibroblastos, com 2,5 AgNORs/nucléolo. Adicionalmente, a atividade metabólica foi de 0,243. Em conclusão, o sistema tegumentar auricular periférico de catetos possui algumas marcantes variações em relação a outros mamíferos, quanto ao número de camadas e espessura da epiderme, quantidade de células epidermais, melanócitos e parâmetros proliferativos.(AU)

The cryopreservation of somatic tissue derived from skin of collared peccaries is an alternative for biodiversity conservation through association with nuclear transfer. In this context, tissue manipulation of skin is a critical step for the success of this biotechnique. Therefore, the aim was to characterize the peripheral ear integumentary system derived from collared peccaries, directing to improve tissue conservation. Thus, ear fragments of eight animals were evaluated for tissue layers, components, proliferative activity and metabolic viability, using hematoxylin-eosin and Gomori Trichrome, AgNORs quantification and transmission electronic microscopy. Hence, sizes of 104.2 µm and 222.6 µm were observed in the epidermis and dermis, with a volumetric ratio of 36.6% and 58.7%, respectively. Moreover, basal layer (22.5 µm), intermediate (53.5 µm) and cornea (28.2 µm), with mean values of 65.3 epidermal cells, 43.4 melanocytes and 14.8 perinuclear halos were evidenced in the epidermal. Already the dermis has 127 fibroblasts with 2.5 AgNORs/nucleolus. Additionally, the metabolic activity was 0.243. In conclusion, the peripheral ear integumentary system derived from collared peccaries possessed some important variations compared to other mammals, as the number of layers and thickness of the epidermis, number of epidermal cells, melanocytes and proliferative parameters.(AU)

Effects of some production factors on the content of kappa-casein in the milk of cows from different herds in Risaralda (Colombia) / Efecto de algunos factores productivos sobre el contenido de kappa-caseína en leche de vacas de diferentes hatos en Risaralda (Colombia) / Efeito de alguns fatores produtivos sobre o conteúdo de kappa-caseína no leite de vacas de diferentes rebanhos no departamento de Risaralda na Colômbia

K-casein is one of the most important milk proteins by their relationship to traits associated with the cheese production. Therefore, the aim of this study was to determine the relationship between some production traits and kappa casein content in the milk of cows in eight herds from Pereira, Risaralda. 48 milk samples from cows were analysed for k-casein content by polyacrylamide gel electrophoresis in one dimension (SDS-PAGE Triazine) and were taken the effect of the breed, the supplementation, calving number, days in milk and milk yield. The information was evaluated using a generalized linear model using R software with agricolae and car libraries (R Core Team). The mean of k-casein was 3.55 g/L and the coefficient of variation was 19.3%, the coefficient of variation for milk production was 40.3%. The traits evaluated was only significant (p<0.05) the type of supplementation and. Was found, an inverse relation of k-casein with the number of calving, although it was not significant, this may be due to number of calving it is indicative of the age of the cow and the racial component of the generation.

La k-caseína es una de las proteínas más importantes de la leche por su relación con diferentes características asociadas a la producción de quesos. Por lo anterior, el objetivo de este trabajo fue determinar la relación entre algunas características productivas y el contenido de kappa caseína de la leche de vacas en ocho hatos del Municipio de Pereira, Risaralda. Para esto, se tomaron muestras de leche de 48 vacas de diferente tipo racial, las que se les determinó el contenido de k-caseína mediante electroforesis en gel de poliacrilamida en una dimensión (Triacina SDS-PAGE) y se determinó el efecto que ejerce el grupo racial, el tipo de suplementación, el número de parto, los días en lactancia, y el volumen de leche producido. La información fue evaluada mediante un modelo lineal generalizado, usando el software R mediante las librerías agricolae y car (R Core Team). Se encontró un valor medio de k-caseína de 3,55 g/L y un coeficiente de variación del 19,3%, el coeficiente de variación para la producción de leche fue de 40,3%. De los caracteres evaluadas sólo fue significativo (p<0,05) el tipo de suplementación. Además, se encontró una relación inversa entre el contenido de k-caseína con el número de parto, aunque no fue significativa, esto se puede deber a que el número de partos es un indicativo de la edad de la vaca y el componente racial de la generación.

A k-caseína é uma das proteínas mais importantes do leite por sua relação com diferentes características associadas a produção de queijos. Pelo anterior, o objetivo deste trabalho foi determinar a relação entre algumas características produtivas e o conteúdo de kappa caseína do leite de vacas em oito rebanhos do município de Pereira, Risaralda. Para isto, tomaram-se amostras de leite de 48 vacas de diferente tipo racial, nas quais determinou-se o conteúdo de k-caseína mediante eletroforese em gel de poliacrilamida em uma dimens ão (Triacina SDS-PAGE) e determinou-se o efeito que exerce o grupo racial, o tipo de suplementação, o número de parto, os dias em lactação e o volume do leite produzido. A informação foi avaliada mediante um modelo linear generalizado usando o software R mediante as livrarias agricolae e car (R Core Team). Encontrou-se um valor médio de k-caseína de 3,55 g/L e um coeficiente de variação de 19,3%, o coeficiente de variação para a produção do leite foi de 40,3%. Dos caracteres avaliados só foi significativo (p<0,05) o tipo de suplementação. Além, encontrou-se uma relação inversa entre o conteúdo de k-caseína com o número de parto, ainda que não foi significativa, isto pode-se dever a que o número de partos é um indicativo da idade da vaca e o componente racial da geração.

Resíduos sólidos em um sistema de drenagem urbana no município de Santa Maria (RS) / Solid waste in a urban drainage system in municipality of Santa Maria (RS), Brazil

RESUMO Com o crescimento da população e o consequente aumento da urbanização, o lançamento de resíduos sólidos nos sistemas de drenagem urbana tem aumentado nos últimos anos, principalmente nas regiões periféricas das cidades. Este estudo teve como objetivo qualificar e quantificar os resíduos sólidos no arroio Cancela-Tamandai, localizado em área urbana, no município de Santa Maria (RS). Foram coletados ao todo 1.153,2 kg de resíduos sólidos com uma precipitação pluviométrica total para o período de novembro de 2012 a janeiro de 2013 de 518,94 mm, sendo, desses, 93,9% composto por matéria orgânica, sendo a maioria vegetação. O arroio Cancela-Tamandai apresentou uma carga de resíduos sólidos igual a 17,27 ou 0,424 kg.hab-1.ano-1. A curva de previsão de resíduos sólidos orgânicos drenados em função da precipitação pluviométrica apresentou correlação de 76,4%, um parâmetro importante para a tomada de decisão dos gestores municipais em relação aos resíduos sólidos gerados. Assim, conceber estratégias para o monitoramento desses resíduos representa passo importante na busca de soluções que visem um melhor gerenciamento de bacias hidrográficas urbanas.

ABSTRACT With population growth, and the resulting increase in urbanization, the disposal of solid waste in the urban drainage system has increased in recent years, especially in the outskirts of the cities. This study aimed to qualify and quantify the solid waste in Cancela-Tamandai's stream, located in an urban area, in the municipality of Santa Maria (RS). Were collected in total 1.153.2 kg of solid waste with a rainfall total for the period of 518.94 mm, 93.9% of these being composed of organic matter with the majority of vegetation debrid. Cancela-Tamandai's watershed presented a load of solid waste equal to 17.27 or 0.424 kg.inhab-1.year-1. The prediction curve of drained solid waste due to the rainfall correlated 76.4%, important parameter for decision making of municipal managers in relation to solid waste generated. Thus, devise strategies for monitoring these residues represents an important step in finding solutions aimed at better management of urban watersheds.

Evaluación de los parámetros de desempeño de un contador hematológico / Evaluation of performance parameters of an automated hematology analyzer / Avaliação dos parâmetros de desempenho de um analisador da hematologia

El primer paso para obtener seguridad en los resultados emitidos por el laboratorio clínico es confirmar que los procedimientos de medida utilizados tienen un desempeño analítico aceptable. Para conseguirlo se verificó el contador hematológico Beckman Coulter LH 750 de acuerdo con las especificaciones del fabricante y con los requisitos de calidad de este laboratorio. Los parámetros de desempeño evaluados, tanto en modo manual como automático, fueron: porcentaje de arrastre, según protocolo CLSI H26-A2, precisión en condiciones de repetibilidad, precisión en condiciones de precisión intermedia y veracidad, según protocolo CLSI EP15-A2 utilizando controles BIO-RAD, intervalo de medición, según protocolo CLSI EP6-A, límite de cuantificación, según protocolo CLSI EP17-A2 e intervalos de referencia, según protocolo CLSI EP28-A3C. Los datos se analizaron mediante LinChecker y GraphPad 5. En los ensayos realizados se cumplió con las especificaciones estipuladas por el fabricante, como así también con el requisito de calidad de este laboratorio que es variabilidad biológica mínima. También se verificaron los intervalos de referencia para individuos adultos. De esta manera, se logró realizar la verificación del contador hematológico, evidenciando que los parámetros analíticos evaluados tienen un desempeño aceptable.

The first step for safety in the results issued by the clinical laboratory is to confirm that all analytical measurement procedures have shown an acceptable analytical performance. A quality performance evaluation of automated hematology analyzer Beckman Coulter LH 750 was performed according to the quality requirements of our laboratory and manufacturer's specifications. The performance parameters evaluated by both manual and automatic mode were: carryover according to CLSI H26-A2 protocol; repeatability, intermediate precision and trueness according to CLSI EP15-A2 protocol and using BIO-RAD controls; linearity according to CLSI EP6-A protocol; quantification limits according to CLSI EP17-A2 protocol; and reference intervals according to CLSI EP28-A3C protocol. Data were analyzed using LinChecker and GraphPad5 programs. The tests performed complied with the requirements stipulated by the manufacturer and the quality requirements of our laboratory like minimal biological variability. Reference intervals for adult individuals were also checked. Consequently, performance evaluation of the automated hematology analyzer showed that the assessed laboratory parameters have acceptable performance.

O primeiro passo para obter segurança nos resultados emitidos pelo laboratório clínico é confirmar que os processos de medição utilizados tenham um desempenho analítico aceitável. Para obtê-los foi verificado o analisador hematológico Beckman Coulter LH 750 de acordo com as especificações do fabricante e os requisitos de qualidade deste laboratório. Os parâmetros de desempenho avaliados, tanto em modo manual quanto automático, foram: percentual de arrastamento, de acordo com o protocolo CLSI H26-A2, em condições de repetitibidade, precisão em condições de precisão intermediária e veracidade, conforme o protocolo CLSI EP15-A2 usando controles Bio-Rad, intervalo de medição segundo o protocolo CLSI EP6-A, limite de quantificação, de acordo com CLSI EP- 17-A2 e intervalos de referência, de acordo com o protocolo CLSI EP28-A3C. Os dados foram analisados através de LinChecker e GraphPad 5. Nos ensaios realizados foram obsevadas as especificações estabelecidas pelo fabricante, bem como a exigência de qualidade deste laboratório que é variabilidade biológica mínima. Os intervalos de referência para indivíduos adultos também foram verificados. Desta forma, foi possível realizar a verificação do analisador hematológico, que demonstra que os parâmetros analíticos avaliados têm um desempenho aceitável.

Morphoquantitative description of bovine digital cushion / Descrição morfoquantitativa do tórus digital de bovinos

The digital cushion is characterized as a modified subcutaneous tissue that absorbs the shock during gait, assists venous return of the hoof and supports a considerable part of body weight. Digital cushions have particular importance in the pathogenesis of the hoof, since they need to properly work in order to prevent compression and traumas in soft tissues. This study aimed to measure and determine how is the arrangement of these structures, and for this it was established the proportions of connective, adipose, vascular tissues and collagen fibers and collagen types found in palmar and plantar digital cushion of bovine using fore and hindlimbs of twelve adult zebu cattle of both sexes, 11 male and one female, with 269kg average carcass weight and without limb disorders. Fragments of cushions were subjected to conventional histology, cut to a thickness of 4µm and stained with Red Picrosirius. With digital optical microscope, the quantification of the connective tissue and differentiation of types of collagen used the Image Pro Plus® software, and of adipose and vascular tissue, the test point system. The mean and standard error were estimated with the GraphPad Prism 5.0 software, and then data were subjected to Kolmogorov-Smirnov normality test and Student's t-test with significance level set at 5% for determining the amount of different tissues between fore and hindlimbs of studied animals. In forelimbs the mean and standard error of the connective tissue proportion was 50.10%+1.54, of the adipose tissue was 21.34%+1.44, and of vascular tissue was 3.43%+0.28. Hindlimbs presented a proportion of connective tissue of 61.61%+1.47, 20.66%+1.53 of adipose tissue, and 3.06%+0.20 of vascular tissue. A significant difference (p<0.001) was detected in the connective tissue proportion between fore and hindlimbs. Types I and II collagen fibers have presented, respectively, a proportion of 31.89% and 3.9% in forelimbs and 34.05% and 1.78% in hindlimbs...

O tórus digital é caracterizado como um tecido subcutâneo modificado que atua na absorção do impacto durante a locomoção, auxilia o retorno venoso do casco e mantêm o suporte de uma considerável parte do peso corporal. Os tórus possuem particular importância nas patogêneses de casco, já que eles precisam trabalhar corretamente para prevenir compressões e traumas nos tecidos moles. Assim, o objetivo deste estudo foi quantificar e com isso determinar, como se arranjam estas estruturas, para tanto, foram estabelecidas as proporções dos tecidos conjuntivo, adiposo, vascular e ainda das fibras colágenas e dos tipos de colágenos encontrados nos tórus digitais palmares e plantares de bovinos. Foram utilizados membros torácicos e pélvicos de doze bovinos zebuínos adultos, de ambos os sexos, sendo onze machos e uma fêmea, com peso médio de carcaça com 269kg e sem afecções nos membros. Os fragmentos dos tórus foram submetidos à técnica histológica convencional, cortados em espessura de 4µm e corados com Picrosirius Red. Com o uso de microscópio óptico digital, o tecido conjuntivo e a diferenciação dos tipos de colágeno foram quantificados empregando-se o programa de análise de imagem Image Pro Plus® e para a quantificação dos tecidos adiposo e vascular foi utilizada o sistema teste de pontos. Através do programa GraphPad Prism 5.0 foram obtidas por meio de uma analise descritiva a media e o erro padrão da media, em seguida os dados foram submetidos à aplicação do teste de normalidade de Kolmogorov-Smirnov e ao teste "T" Student com nível de significância de 5% para a determinação da quantidade encontrada dos diferentes tecidos entre os membros torácicos e pélvicos dos animais estudados. Nos membros torácicos a média e o erro padrão da proporção de tecido conjuntivo foi de 50,10%+1,54, a de tecido adiposo foi de 21,34%+1,44 e a de tecido vascular foi de 3,43%+0,28. Os membros pélvicos...

Pharmacokinetic-pharmacodynamic correlation of imipenem in pediatric burn patients using a bioanalytical liquid chromatographic method / Correlação farmacocinética-farmacodinâmica de imipenem em pacientes queimados pediátricos utilizando um método bioanalítico de cromatografia líquida

A bioanalytical method was developed and applied to quantify the free imipenem concentrations for pharmacokinetics and PK/PD correlation studies of the dose adjustments required to maintain antimicrobial effectiveness in pediatric burn patients. A reverse-phase Supelcosil LC18 column (250 x 4.6 mm 5 micra), binary mobile phase consisting of 0.01 M, pH 7.0 phosphate buffer and acetonitrile (99:1, v/v), flow rate of 0.8 mL/min, was applied. The method showed good absolute recovery (above 90%), good linearity (0.25-100.0 µg/mL, r²=0.999), good sensitivity (LLOQ: 0.25 µg/mL; LLOD: 0.12 µg/mL) and acceptable stability. Inter/intraday precision values were 7.3/5.9%, and mean accuracy was 92.9%. A bioanalytical method was applied to quantify free drug concentrations in children with burns. Six pediatric burn patients (median 7.0 years old, 27.5 kg), normal renal function, and 33% total burn surface area were prospectively investigated; inhalation injuries were present in 4/6 (67%) of the patients. Plasma monitoring and PK assessments were performed using a serial blood sample collection for each set, totaling 10 sets. The PK/PD target attained (40%T>MIC) for each minimum inhibitory concentration (MIC: 0.5, 1.0, 2.0, 4.0 mg/L) occurred at a percentage higher than 80% of the sets investigated and 100% after dose adjustment. In conclusion, the purification of plasma samples using an ultrafiltration technique followed by quantification of imipenem plasma measurements using the LC method is quite simple, useful, and requires small volumes for blood sampling. In addition, a small amount of plasma (0.25 mL) is needed to guarantee drug effectiveness in pediatric burn patients. There is also a low risk of neurotoxicity, which is important because pharmacokinetics are unpredictable in these critical patients with severe hospital infection. Finally, the PK/PD target was attained for imipenem in the control of sepsis in pediatric patients...

Desenvolveu-se e aplicou-se método bioanalítico para quantificar concentrações de imipenem livre para estudos de farmacocinética (PK) e de correlação PK/PD dos ajustes de dose requeridos para manter a efetividade antimicrobiana em pacientes pediátricos queimados. Utilizou-se coluna Supelcosil LC18 (250 x 4,6 mm 5 micra), fase móvel binária, consistindo de tampão fosfato 0,01M pH 7,0 e acetonitrila (99:1, v/v) e fluxo de 0,8 mL/min. O método mostrou boa recuperação absoluta (acima de 90%), boa linearidade (0,25-100,0 µg/mL, r²=0.999), boa sensibilidade (LLOQ: 0,25 µg/mL; LLOD: 0,12 µg/mL) e estabilidade aceitável. Os valores de precisão inter/intradia foram 7,3/5,9% e a exatidão média foi de 92,9%. O método bioanalítico foi aplicado para quantificar concentrações de fármaco livre em crianças com queimaduras, Seis pacientes pediátricos queimados (idade média de 7,0 anos, 27,5 kg), com função renal normal e 33% da superfície total queimada foram investigados prospectivamente. Lesões por inalação estavam presentes em 4/6 (67%) dos pacientes. O monitoramento plasmático e a as avaliações de PK foram efetuadas utilizando coleção de amostras seriais de sangue para cada série, totalizando 10 conjuntos. O alvo PK/PD alcançado (40%T>MIC) para cada concentração inibitória mínima (MIC: 0,5, 1,0, 2,0, 4,0 mg/L) ocorreu em porcentagem maior do que 80% dos conjuntos investigados e 100% após o ajuste de dose. Em conclusão, a purificação das amostras do plasma usando técnica de ultrafiltração seguida de quantificação das medidas do imipenem no plasma usando método de cromatografia líquida é bastante simples, útil e necessita de pequenos volumes para as amostras de sangue. Além disso, pequena quantidade de plasma (0,25 mL) é necessário para garantir a efetividade do fármaco nos pacientes pediátricos queimados. Há, ainda, baixo risco de neurotoxicidade, o que é importante, visto que as farmacocinéticas são imprevisíveis nesses pacientes...

Development and validation of analytical methodology with focus on the qualification of powder mixers / Misturadores de pós/validação analítica; Espectrofotometria; Óxido férrico/quantificação; Lactose monoidratada/análise quantitativa

This study aims at developing an analytical procedure capable of quantifying the ferric oxide present in the mixture of ferric oxide/lactose monohydrate (0.4% w/w). The analytical procedure was checked for specificity, linearity, precision (system repeatability, procedure repeatability and intermediate precision), accuracy, stability of solutions and robustness of the procedure. The concentration of Fe (III) was determined by spectrophotometry at 480 nm based on calibration curves. The specificity was verified. The linearity was obtained in the range of 11.2 to 16.8 µg of ferric oxide/mL. The relative standard deviation (RSD) of the system repeatability, procedure repeatability and intermediate precision, were not more than 2%. The RSD of the accuracy values were less than 0.75%. The stability of the samples was checked over a 24 hours assay. In the robustness evaluation, the wavelength and the concentration of hydrochloric acid varied. The maximum absorbance deviation due to wavelength variation was 0.14 percent, and the maximum deviation due to the hydrochloric acid concentration variation was 2.4%, indicating that the concentration of hydrochloric acid is critical to the analysis of ferric oxide. The procedure developed was validated and is suitable to the performance qualification of powder mixers..

O objetivo deste trabalho foi desenvolver um método analítico capaz de quantificar o óxido férrico presente na mistura óxido férrico/lactose monoidratada (0,4% w/w). Verificou-se a especificidade, linearidade, precisão (repetibilidade do sistema, repetibilidade do método e precisão intermediária), exatidão, estabilidade das soluções e robustez. A concentração de Fe(III) foi determinada por espectrofotometria em 480 nm com base em curvas de calibração. Verificou-se a especificidade verificada. A linearidade foi obtida na faixa de 11,2 a 16,8 µg de óxido férrico/mL. O desvio padrão relativo (DPR) da repetibilidade do sistema, método e precisão intermediária foram inferiores a 2%. Os valores de DPR da exatidão foram inferiores a 0,75%. A estabilidade das amostras foi verificada ao longo de 24 horas de ensaio. Na avaliação da robustez variou-se o comprimento de onda e a concentração de ácido clorídrico. O desvio máximo de absorbância ao se variar o comprimento de onda foi de 0,14%, enquanto que para a concentração de ácido clorídrico o desvio foi de 2,4% para a concentração de 0,8 M. Assim, a concentração de ácido clorídrico é crítica para a análise de óxido férrico. O método desenvolvido foi validado e é adequado à qualificação do desempenho de misturadores de pós e granulados...

Quantificação da angiogênese induzida por tumor em membrana corioalantóica de embrião de galinha / Quantification of tumor-induced angiogenesis on chicken embryo chorioallantoic membrane

Angiogênese é um processo de surgimento de novos microvasos provenientes de vasos sanguíneos já existentes. O desenvolvimento tumoral e o processo de metástase são dependentes de angiogênese, pois o tumor em crescimento necessita de uma rede capilar que forneça nutrientes e oxigênio. A membrana corioalantóica de embrião de galinha (CAM) é um modelo experimental in vivo que oferece muitas vantagens, como a alta vascularização natural e alta taxa de reprodução, além de ser um modelo simples e de baixo custo. A CAM é composta por proteínas de matriz extracelular, que mimetizam o ambiente fisiológico de células cancerosas. A etapa de contagem do número total de vasos permite a determinação dos efeitos dos estímulos pró ou anti angiogênicos, portanto a padronização de um método eficaz é necessário. O presente estudo teve como objetivo geral avaliar o potencial angiogênico de células de uma linhagem de adenocarcinoma de cólon humano (HT29) e propor um método para quantificação da angiogênese induzida por células tumorais na CAM. Os embriões foram mantidos em sistema ex ovo. No oitavo dia, foram adicionados sobre a CAM, implantes de colágeno contendo células tumorais em diferentes concentrações. No décimo primeiro dia foi feito o registro fotográfico utilizando microscópio estereoscópico e foram determinados quatro scores para a quantificação e caracterização dos vasos, considerando-se se seccionavam o implante e também seu grau de ramificação. A contagem dos vasos, feita em uma área específica ao redor do implante, foi realizada após edição das imagens pelo programa Image Pro Plus. Os resultados mostraram aumento significativo do número de vasos que não seccionavam o implante para aqueles contendo 3 x 104 e 6 x 104 células. Pode-se concluir que a metodologia de contagem dos vasos, utilizando registros fotográficos e edições de imagens, é eficaz. Demonstrou-se que as células HT29 induzem a uma alteração no padrão de crescimento de novos vasos quando depositada sobre a CAM em implantes de colágeno e podem ser utilizadas como modelo experimental para se investigar o efeito de diferentes compostos sobre a angiogênese induzida por tumor.

Angiogenesis is a process of sprouting of new microvessels from existing blood vessels. The tumoral development and the metastasis process are angiogenesis dependent, because the growing tumor needs a capillaries network that provides nutrients and oxygen. The chicken chorioallantoic membrane (CAM) is an experimental in vivo model which offer many advantages, such as the high natural vascularization and high reproducibility, besides the simplicity and low cost. The CAM contains extracellular matrix proteins, which mimics the physiological cancer cell environment. The counting of the total number of vessels allows a determination of pro- and anti-angiogenic effects of different stimulus, therefore patterning an effective method is necessary. The general goal of the present study was to evaluate the angiogenic potential of a human colon adenocarcinoma cell line (HT29) and propose a method to quantify angiogenesis induced by cancer cells on the CAM. Embryos were cultivated in an ex ovo system. At the eighth day, collagen implants containing cancer cells in different concentrations were added on the top of CAM. At the eleventh day, the photographic records were made by using stereoscope microscope and were determined four scores for vessels quantification and characterization. Vessels counting were done in a specific area around the implant, and edition of the captured images were done using Image Pro Plus software. Our results showed a significant increase in vessels that do not section the implant. It was demonstrated that HT29 cells induce a change in the pattern of growth of new blood vessels when placed on CAM into collagen implants and can be used as an experimental model for investigating the effect of different compounds on tumor-induced angiogenesis.

Detection, quantification and genetic variability of Mycoplasma hyopneumoniae from apparently healthy and pneumonic swine / Detecção, quantificação e variabilidade genética de Mycoplasma hyopneumoniae a partir de suínos pneumônicos e aparentemente saudáveis

Molecular differences among Mycoplasma hyopneumoniae strains present in pneumonic lungs of swine have been largely studied. However, no comparative studies concerning the strains present in apparently healthy pigs have been carried out. This study aimed to detect, quantify and perform molecular analysis of M. hyopneumoniae strains in pig lungs with and without pneumonic lesions. The detection of M. hyopneumoniae was performed using multiplex PCR (YAMAGUTI, 2008), real-time PCR (STRAIT et al., 2008) and multiple VNTR amplification (VRANCKX et al., 2011). Molecular characterization of the strains was achieved by analysis of the VNTR copy number in P97R1, P146R3, H2R1 and H4. M. hyopneumoniae was detected in samples from healthy and pneumonic pigs and the amount of M. hyopneumoniae positive samples detected varied with the type of assay. The greater number of positive samples was identified by the multiple VNTR amplification combined with capillary electrophoresis. Using real-time PCR, 4.9*104 M. hyopneumoniae genome copies/mL was detected in apparently healthy lungs. A mean quantity of 3.9*106 M. hyopneumoniae genome copies/mL was detected in pneumonic lungs. The analysis of VNTR copy number demonstrated a high genetic variability of the M. hyopneumoniae strains present in apparently healthy and pneumonic lungs. Strains having 3 VNTR copy number in P97R1, were detected only in pneumonic lungs and strains having 40 and 43 VNTR copy number in P146R3 were detected only in apparently healthy lungs. Despite the genetic variability of M. hyopneumoniae, predominant strains in the swine farms could be identified...

As diferenças moleculares entre as estirpes de Mycoplasma hyopneumoniae presentes em pulmões de suínos com pneumonia tem sido estudadas. Porém, estudos comparativos relativos as estirpes presentes nos suínos aparentemente saudáveis não foram levados a cabo. O objetivo do estudo foi a detecção, quantificação e analise molecular de M. hyopneumoniae nos pulmões suínos com e sem lesões pneumônicas. Para a detecção de M. hyopneumoniae usaramse o PCR Multiplo (YAMAGUTI, 2008), o PCR a Tempo Real (STRAIT et al., 2008) e a amplificação de múltiplo VNTR (VRANCKX et al., 2011). A caracterização molecular das estirpes foi realizada mediante a análise do número de copias de VNTR em P97R1, P146R3, H2R1 e H4. O M. hyopneumoniae foi detectado em amostras de suínos saudáveis e pneumônicos e a quantidade de M. hyopneumoniae nas amostras positivas variou com o tipo de ensaio. O maior número de amostras positivas foi identificado pela amplificação de múltiplas VNTR combinado com a eletroforese de capilares. Usando o PCR a Tempo Real, 4.9*104 copias de genoma/mL de M. hyopneumoniae foram detectadas em pulmões aparentemente saudáveis. Uma quantidade média de 3.9*106 copias de genoma/mL de M. hyopneumoniae foi detectada em pulmões pneumônicos. A análise do número de copias de VNTR demonstrou uma elevada variabilidade...

Development and validation of a rapid turbidimetric assay to determine the potency of norfloxacin in tablets

Norfloxacin is one of the first commercially available (and most widely used) fluoroquinolone antibiotics. This paper reports the development and validation of a simple, sensitive, accurate and reproducible turbidimetric assay method to quantify norfloxacin in tablets formulations in only 4 hours. The bioassay is based on the inhibitory effect of norfloxacin upon the strain ofStaphylococcus epidermidis ATCC 12228 IAL 2150 used as test microorganism. The assay was performed 3x3 parallel lines like, three tubes for each concentration of reference substance and three tubes for each sample concentration. The results were treated statistically by analysis of variance and were found to be linear (r2 = 0.9999) in the selected range of 25-100 μg mL-1; precise (intra-assay: relative standard deviation (RSD) = 1.33%; inter-assay: RSD = 0.21%), accurate (100.74%) and robust with RSD lower than 4.5%. The student's t-test showed no statistically significant difference between the proposed turbidimetric method and an HPLC method previously validated. However the turbidimetric assay can be used as a valuable alternative methodology for the routine quality control of this medicine, complementary to other physical-chemical methods.

O norfloxacino foi a primeira fluorquinolona (e mais utilizada) disponível no mercado. Este trabalho divulga um novo desenvolvimento e validação de um método turbidimétrico simples, sensível, preciso e reprodutível para a quantificação de norfloxacino em comprimidos em apenas 4 horas. O bioensaio é baseado no efeito inibitório de norfloxacino sobre a cepa Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 IAL 2150, utilizada como micro-organismo teste. O bioensaio foi efetuado através do delineamento de linhas paralelas 3x3, em que três tubos foram utilizados para a solução padrão e três tubos para as concentrações da amostra. Os resultados foram tratados estatisticamente pela análise de variância, apresentando coeficiente de correlação linear der2 = 0,9999, na faixa de 20 a 100 μg mL-1; precisão (intra-ensaio: desvio padrão relativo (RSD) 1,33%; inter-ensaio: RSD=0,21%), exatidão (100,74%) e robustez com RSD menor que 4,5%. O teste-tmostrou não haver diferença estatisticamente significativa entre o método turbidimétrico proposto e um método por HPLC previamente validado. No entanto, o ensaio turbidimétrico pode ser utilizado como método alternativo para o controle de qualidade de rotina para este antimicrobiano, como um complemento de outros métodos físico-químicos.

Avaliação de diferentes alíquotas de enxaguadura para a contagem pelo método direto de Campylobacter spp. em carcaças de frango resfriadas / Evaluation of the different rinse volumes for performing the direct technique for Campylobacter spp. enumeration in chilled broiler carcasses

O método direto de detecção e contagem de Campylobacter spp. em carne de frango é de fácil execução, porém os volumes de 100 μL e de 400 μL, preconizados em algumas metodologias, muitas vezes impossibilitam a contagem de colônias pela ocorrência de crescimento confluente ou de microbiota contaminante. O objetivo do presente estudo foi de avaliar os diferentes volumes de enxaguadura de carne de frango com a finalidade de minimizar a interferência da microbiota contaminante, sem comprometer a sensibilidade do método. Os volumes de enxaguadura de 5, 10,50, 100 e 400 μL foram testados utilizando-se os meios seletivo diferenciais ágar carvão cefoperazona desoxicolato modificado (mCCDA) e ágar Bolton modificado. A presença de Campylobacter spp. foi confirmada por métodos fenotípicos e por PCR. No entanto, a estratégia de utilização de volumes menores do que 100 μL de enxaguadura não melhoraram o isolamento e a contagem de colônias de Campylobacter, porque houve diminuição da sensibilidade do ensaio. A provável solução para minimizar a interferência da microbiota contaminante seria desenvolver novos meios seletivos ou incorporá-los aos antimicrobianos já existentes...